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土壤酸性轉化酶(S-AI)活性檢測試劑盒說明書

土壤酸性轉化酶(S-AI)活性檢測試劑盒

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土壤酸性轉化酶(S-AI)活性檢測試劑盒原理圖

一、土壤酸性轉化酶(S-AI)活性檢測試劑盒簡介

土壤酸性轉化酶(S-AI)作為催化蔗糖降解的重要酶類,能夠在酸性條件下催化蔗糖分解為果糖 和葡萄糖,是土壤蔗糖代謝的關鍵酶之一,對增加土壤中可溶性營養物質起著重要作用,同時能夠表 征土壤生物學活性強度,也可作為評價土壤熟化程度和肥力水平的參照指標。 土壤酸性轉化酶能夠催化蔗糖分解為葡萄糖和果糖,進一步與 3,5-二硝基水楊酸反應,生成棕紅 色氨基化合物,產物在 540 nm 處具有特征吸收峰,通過吸光值變化即可表征土壤酸性轉化酶的活性。


二、土壤酸性轉化酶(S-AI)活性檢測試劑盒產品內容

土壤酸性轉化酶(S-AI)活性檢測試劑盒內容圖



三、土壤酸性轉化酶(S-AI)活性檢測試劑盒產品說明

測定過程中所需要的儀器和試劑:可見分光光度計、1 mL 玻璃比色皿、可調式移液器、臺式離 心機、烘箱、30-50 目篩、恒溫水浴/培養箱、甲苯和蒸餾水。

1.土壤樣本的預處理 新鮮土樣自然風干或 37℃烘箱風干,過 30-50 目篩。


2.測定步驟 ①分光光度計預熱 30 min 以上,調節波長至 540 nm,蒸餾水調零。 ②在離心管中依次加入下列試劑(可根據預實驗結果適當調整樣本量): 試劑 測定管 (μL) 對照管 (μL) 標準管 (μL) 空白管 (μL) 風干土樣(mg) 100 100 - - 標準稀釋液 - - 800 - 試劑一 - 800 - 800 試劑二 800 - - - 甲苯 20 20 20 20 37℃反應 60 min,立即 95℃處理 10 min(密封以防止水分散失) 冰浴迅速冷卻至室溫,10000 rpm 常溫離心 10 min,取上清 上清液 700 700 700 700 試劑三 300 300 300 300 充分混勻,95℃顯色 10 min(密封以防止水分散失) 冰浴迅速冷卻至室溫。


3.吸光值測定:測定 540 nm 處吸光值,記為 A 測定、A 對照、A 標準和 A 空白;計算?A 測定=A 測定-A 對照,?A 標準=A 標準-A 空白。注:空白管只需測定 1-2 次,每個測定管均需設一個對照管。 標準曲線的建立:以 0.24、0.20、0.16、0.12、0.08、0.04 mg/mL 為橫坐標(x),以其對應的 ΔA 標準為縱坐標(y),繪制標準曲線,得到線性回歸方程 y=kx+b,將 ΔA 測定帶入公式得到 x(mg/mL)。


4.土壤酸性轉化酶(S-AI)活性計算 單位定義:37℃條件下,每 g 土壤每天催化生成 1 mg 還原糖定義為一個酶活力單位。 S-AI(U/g)= x×V2 W×T = 19.2×x W 注釋:V2:反應體系中加入試劑二的體積,0.8 mL;W:風干土壤樣本質量,g;T:反應時間: 60 min=1/24 d 。


土壤酸性轉化酶(S-AI)活性檢測試劑盒注意圖

四、土壤酸性轉化酶(S-AI)活性檢測試劑盒產品注意事項 

①若測定吸光值超出標準吸光值線性范圍:高于標準上限值建議將上清液使用蒸餾水稀釋或適當 減少樣本量后再進行測定;低于標準下限值建議適當增加樣本量或適當延長酶促反應時間后再進行測 定,計算時相應修改。

②為保證結果準確且避免試劑損失,測定前請仔細閱讀說明書(以實際收到說明書內容為準), 確認試劑儲存和準備是否充分,操作步驟是否清楚,且務必取2-3個預期差異較大的樣本進行預測定。


土壤酸性轉化酶(S-AI)活性檢測試劑盒產品鏈接:http://www.www.ukongfit.cn/products-283.html

 

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